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定量PCR 和 数字PCR:优势和最佳用途
技术原理 数字PCR(digital PCR,dPCR)技术是继第一代普通PCR和第二代荧光定量PCR之后的第三代核酸扩增与检测技术,是目前灵敏度最高的绝对定量手段。其核心是通过将反应液均匀分配到数万个独立的PCR反应单元进行单分子级扩增,再对荧光信号计数,并结合泊松分布原理,获得靶标分子拷贝数信息。
数字PCR的基本操作主要包含样本制备、微滴生成、核酸扩增和数据分析四步。制备好的体系在微流控芯片内生成2万个以上均一、稳定的单层平铺微滴,完全密封在芯片内进行PCR扩增。扩增结束后,对产物进行超高分辨率荧光信号采集,最后通过软件自动统计分析待测靶标浓度。
感染病原体检测及检测
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